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FTA采血卡中制备样品的最佳做法

FTA采血卡中制备样品的最佳做法

血源性传染病的诊断主要依赖于检测血液样本中的致病因子。分子技术为此提供了敏感和特定的工具,尽管在现场环境中使用这些方法存在相当大的困难。在大规模流行病学研究中,FTA采血越来越受欢迎,可以快速收集和存档大量样品。然而,这些卡的下游处理存在一些困难,这对于准确诊断感染是必不可少的。在这里,我们描述了使用PCRFTA采血卡进行样本处理的最佳实践方法的建议,用于锥虫病的分子诊断。

对五种技术进行了比较。直接施用全血的检测灵敏度(35.6%)低于全血,随后使用螯合树脂10056.4%)从卡上洗脱。当在FTA卡上施用血液之前裂解时,获得了更好的表观敏感性(73.3%),尽管这并不重要。使用螯合树脂10073.3%)进行后续洗脱后,这种情况没有改善,与野外血液直接DNA提取无显着差异(68.3%)。

基于这些结果,这些技术所需的努力程度以及现场条件下DNA提取的难度,我们建议将血液转移到FTA卡上,然后在螯合树脂100中作为最佳方法进行洗脱。

在普通滤纸上常规采集血液和血沉棕黄层样品,用于分析和检测不同的血液病原体。尽管在滤纸上收集大量采样的血液样本似乎比其他采样程序更方便,例如原位DNA提取,但滤纸不适合长期储存,因为它们不能保护样品免受破坏和退化。

FTA)技术在这种基于纸张的系统上得到了改进。FTA采血卡设计用于直接从组织中固定和储存核酸,从而可以收集和存档核酸。FTA基质浸渍有蛋白质变性剂,其导致细胞和任何接触的生物体的裂解。此外,这些化学物质在干燥过程中会抑制碎屑,以确保卡片的安全处理而不存在生物危害的风险。FTA技术还包括螯合剂和自由基捕集阱,用于处理大气污染物,从而在室温下保护捕获的核酸至少10以上

FTA采血卡

 


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