塑料培养皿的应用

20世纪60年代,Friedenstein等[1]发现,在塑料培养皿中培养的贴壁非造血骨髓单核细胞在一定条件下可分化为成骨细胞、成软骨细胞、脂肪细胞和成肌细胞,而且这些细胞经过20~30个培养周期,仍能保持多向分化潜能。这些细胞就是近几年来在细胞领域一直倍受关注的骨髓间充质干细胞((骨髓间充质干细胞,MSCs)。由于MSCs具有自我更新、分化增殖和多向分化潜能的特点[2],MSCs作为一种重要的载体细胞在基因治疗中越来越引起人们的关注,成为近年来国内外研究的热点,本文就目前MSCs在基因治疗中的应用研究进行综述。1MSCs的分离培养目前用于分离MSCs的方法主要有4种:密度梯度离心法、贴壁筛选法、流式细胞仪分选法和免疫磁珠法。Hung等[3]报道Percoll分离液密度梯度离心法的MSCs获得率很低;而免疫磁珠分选法针对MSCs特异性表面抗原,费用昂贵,操作复杂,分选难度大;流式细胞仪分选法的共聚焦激光对细胞的活性有毒害作用。目前应用比较广泛的是贴壁筛选法结合密度梯度离心法,效果相对较好,但是具体选择何种方法还要依赖于实验目的和条件。MSCs一般取自于动物的股骨、胫骨,培养MSCs时