存储在FTA采血卡上的死后血液中的DNA质量和数量高达16年

发布日期：2019-03-23 作者：点击：

保存在FTA采血卡上的血液样本为基因研究提供了独特的机会。从这些采血卡中回收的DNA应该长时间保持稳定。然而，由于在相当长的时间内存储在FTA卡上的DNA在法医或基因组DNA分析方面的要求有多好，特别是对于质量因初次收集而有所不同的死后样本，因此尚不完善。这项研究的目的是评估从16岁以上的死后血腥FTA采血卡中提取的DNA质量和数量的时间依赖性降解。收集来自1998年至2013年的8个时间点的四个随机FTA样品并一式三份提取。用Quantifiler（?）Human Plus（HP）Quantification试剂盒测定提取的DNA样品的数量和质量。通过比较回收的DNA产量来评估内部样品和样品与样品的变化。随后将来自一式三份样品的DNA组合并标准化用于进一步分析。从具有法医学和药物遗传学靶标记的标准化样品评估降解对DNA质量的实际影响。我们的研究结果表明：（1）PM变化，例如采样前的血液凝固，会影响回收的DNA产量，从而产生内部和样品间的变异; （2）观察到FTA卡储存时间与DNA量之间呈负相关（r = -0.836，处于0.01水平）; （3）在FTA卡存储时间和降解水平之间发现正相关（在0.01水平r = 0.738）。但是，使用的方法没有观察到抑制。

FTA采血卡

功能应用清楚地表明了降解的影响。尽管获得了所有样品的完整STR-谱，但有证据表明降解表现为较大尺寸扩增子中峰高的降低。使用大的5.1kb CYP2D6基因片段显着降低扩增成功，该片段强烈支持储存样品的降解。根据我们的结果，存储在FTA卡上的DNA在很长一段时间内相当稳定。从该存储介质中提取的DNA可以用作人类鉴定目的，因为所使用的方法足够敏感并且扩增子大小倾向于<400bp。然而，DNA完整性在储存期间受到影响。应根据预期应用考虑这种影响，特别是如果需要高质量的DNA和长PCR扩增子。