采血卡干血斑的洗脱与分析

发布日期：2019-04-03 作者：点击：

采血卡干血斑的洗脱与分析

使用一次性使用的6毫米设备从903级过滤采血卡的每个血液浸泡的圆圈中打出一个点。将所有穿孔的干血斑从单个患者转移到12孔板的一个孔中。

用含有0.05％吐温20和0.08％叠氮化钠的磷酸盐缓冲盐水填充孔。使添加的缓冲液的体积适应用于随后分析干血斑洗脱液的测定的最小相应要求。重复这些步骤以获得第二系列干血斑洗脱液以进行分子分析。将细胞培养板置于实验室振荡器上，让打孔干燥的血斑轻轻洗脱至少4小时，或优选O / N。第二天，斑点几乎没有血液并且已形成溶血上清液。将这些洗脱液转移到微量离心管中。然后，使它们以10,500×g离心2分钟以从洗脱期间形成的任何碎片中释放上清液。

洗脱液分析

离心洗脱液现在可以用于预期的分析.使用市售试剂盒研究乙型肝炎病毒，丙型肝炎病毒和HIV感染标志物的洗脱液，并仔细遵循各自制造商的说明。

本通信中提出的用于制备和处理用于免疫测定和分子技术的干血斑的方案的图形概述。通过静脉穿刺或通过刺血针刺穿皮肤获得的全静脉血和毛细血管血液可以用作干血斑分析的样本。在将血液转移到903级过滤采血卡的圆圈后，样品应在环境温度下在生物危害安全柜中优选O / N干燥，以形成均匀褐色的斑点，没有任何红色的散布地区。当血斑干燥完成并需要储存时，滤纸可以包装在含有1-2个干燥剂小袋的不透气的拉链袋中。DBS的进一步实验室处理包括通过来自圆心的6mm单次使用装置产生冲头，在基于PBS的缓冲液中冲洗冲头至少4小时，或者优选地，振荡器上的O / N，洗脱液的回收，最后离心实验室杯以使DBS洗脱液从洗脱过程期间可能产生的任何碎片中释放出来。随后，DBS洗脱液可用于分析，其通过全自动平台进行，以分别检测HBV，HCV和HIV感染的血清学标志物。请点击此处查看该图的放大版本。