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FTA采血卡与DNA采血卡直接提取法的研究与应用
一种简约且易于自动化操作的Whatman FTA采血卡血样DNA提取方法。方法取直径1.2mmFTA采血卡血样,分别用FTA-DNA直接提取法及FTA常规提取方法提取DNA,AB-IdentifilerTM试剂盒分别进行10μl和25μl体系检测比较,并筛选批量FTA采血卡血样DNA自动化提取程序。结果200份FTA卡血样分别采用2种方法提取DNA模板,25μl体系PCR-STR检测,分型结果均良好。10μl体系检测,FTA-DNA直接提取法优于FTA常规提取方法,图谱RFU值为1000~2000,采用自动化工作站运行该提取程序较手工操作DNA分型图谱均衡性更佳;采用FTA常规提取方法检测,图谱RFU值100~2000,小片段优先扩增现象明显,且有19%的样本出现丢峰现象,采用自动化工作站运行该程序对其结果改善不明显。经工作站运行FTA-DNA直接提取法自动程序及10μl体系检测本2万余份FTA卡采集的血样,均获得16个STR基因座DNA分型结果。
本文建立的FTA-DNA直接提取法适用于FTA卡血样自动化DNA建库。详细介绍了一种简便、快速、安全的用于DNA制备的方法。方法:查阅了大量国内外关于FTA卡及其应用方面的文章。结果:详细介绍了FTA卡在模板DNA制备以及在基因的储藏、医学检测以及食源性致病菌的检测方面的具体应用。结论:FTA卡可作为一种通用、快速、简便的DNA模板制备方法可用于生物学各方面的研究。
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