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塑料培养皿的使用范围
1.在无菌但空的塑料培养皿的底部边缘(而不是盖子)的边缘贴上标签,至少要标上您的姓名,日期,生长培养基的类型以及要添加到融化的琼脂培养基中的生物的类型。如果进行平板连续稀释或一系列重复稀释,则应包括稀释因子,这会导致样品中细胞浓度的系统降低。如果样品中的细胞数量超过琼脂平板的容量,则必须准备系列稀释液,在统计学上重要的范围是30到300cfu。如果板上有超过300 cfu,则菌落将变得拥挤和重叠。
2.获得一个装有18 ml融化琼脂培养基的试管。
琼脂培养基应分配到试管中,并在高压灭菌器中进行预灭菌。在进行实验的同一天,琼脂应在蒸锅中融化30分钟,然后转移到55°C水浴中。由于不能重复使用,只能融化实验所需的琼脂。倒板前十分钟,应将融化的琼脂管从55°C水浴中转移到设置在48°C的实验室工作台上的加热块中。琼脂达到此温度后,即可倒出。如果琼脂太热,则样品中的细菌可能会被杀死。如果琼脂过冷,则一旦固化,培养基可能会结块。
3. 获取您的样品,它应该是通过将菌落中的细胞混合到缓冲液或盐水中而产生的细胞悬浮液。样品可以源自单个样品的稀释系列。要镀的样品量应在0.1到1.0毫升之间。
4. 打开空的陪替氏塑料培养皿的盖子,然后将样品分配到板的中间。关上盖子。在整个过程中使用无菌技术。使用血清移液器或微量移液器将样品转移到板上。控制样品的流量,使其不会溅出板。
5.从融化的琼脂管上取下盖子,并使开口管的边缘穿过本生灯的火焰。
6.打开装有样品的培养皿的盖子,然后将琼脂小心倒入。盖上盖子,然后通过轻轻旋转平板将样品与琼脂混合。
7.倒置塑料培养皿之前,让琼脂彻底固化。