采血卡干血斑样品的稳定性评价

发布日期：2023-05-06 作者：点击：

采血卡干血斑法对不稳定样品的保存与一般的样品处理法方相比具有一定优势。大多数的干血斑样品可以在室温条件下保存，但是对于不稳定的分析物，低温可以延长保存时间。如酰基肉碱在干血斑在储存在室温条件超过2周会出现因为水解作用而不稳定的情况，但是储存在-18℃条件下可至少在330d内保持稳定。

如果不进行分析无德稳定性试验（覆盖样品采集到分析过程），仅仅开展样品的重复分析测定不能评价分析物的稳定性。一般而言，分析物在DNA采血卡干血斑上的稳定性需要考察一种或几种储存条件（-60℃、-15℃、2～8℃、18～22℃）。

（1）比较不同储存周期的QC样品（低、中、高3个浓度，一式3份）的测量值与标示值的差异；

（2）比较真实样品第一次测量值与经过不同储存周期后的测量值。前者称为QC样品稳定性，后者称为真实样品稳定性。QC样品稳定性的差异应不超过标示值的±15%。对于真实样品的稳定性，每一种储存条件至少选择20个样品进行重复分析，不选择低于定量下限或者小于3倍定量下限浓度的样品。重复测定的结果与两次测定的平均值的比值应在80%-120%，并且至少283的样品符合上述标准。真实样品稳定性的结果不仅阐明了目标化合物（包括氨基或酯化的化合物）的稳定性情况，还揭示了可能由水解或降解导致的转化。任何明显的浓度下降意味着目标化合物的浓度显著增加可能由代谢物转化或者共轭分子水解引起。

另外，有必要将QC样品放置在高温条件下（30～40℃、40～50℃或50～70℃）或者冻融3次进行稳定性试验，用来模拟样品运输过程的极端条件或者样品储存在低温环境的情况下。上述 QC样品的测定要随行标准曲线和普通QC样品，一至三份，并且偏差应在标示值和普通的±15%，这样才能说明干血斑样品在高温或者冻融条件下使稳定的。

有些化合物易发生酶降解，这种过程可能发生在干燥阶段或者在点样之前，但酶抑制剂又不方便在点样前添加，因此必须对没有经过任何处理的分析物在全血中2～3h的稳定性进行考察，已覆盖血样采集和干燥过程。如果试验结果显示样品不稳定，那么该化合物不适合干血斑点样。

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